5.2.6. ¿Que puedo hacer si mi laboratorio no cuenta con un microscopio de fluorescencia?

Aunque la prueba de inmunofluorescencia directa (IFD), también conocida como la prueba de anticuerpos fluorescentes (FAT) sigue siendo el estándar de oro para el diagnóstico de la rabia, existen pruebas de laboratorio alternativas.

La prueba rápida de imunohostoquimica directa (dRIT de sus siglas en ingles), usa un microscopio óptico de luz común para analizar las improntas de cerebro procesadas, lo cual la hace una técnica más apropiada para los laboratorios que cuentan con una infraestructura de equipo más limitada (por ejemplo, a nivel provincial o regional). La dRIT aún no ha sido aprobada por la OIE ni la OMS como reportar casos de rabia, a pesar que varios estudios han validado su nivel de concordancia con el de la IFD.

Los laboratorios de referencia regionales deberían de llevar a cabo estudios de evaluación y validación de la dRIT usando el nivel de concordancia con la IFD antes de distribuir o recomendar ampliamente esta prueba como alternativa a la IFD. Para encontrar información más detallada sobre el equipamiento, reactivos y protocolos sobre el uso de la dRIT para el diagnóstico de rabia (entre aquí) y para la IFD (entre aquí). Entre aquí para enterarse de los laboratorios disponibles donde se hace diagnóstico de rabia. Dirigirse a las Secciones 4.3 to 4.5 del Plan Maestro de Vigilancia de la Rabia (Rabies Surveillance Blueprint) para obtener más detalles sobre el uso de la dRIT en el diagnóstico.

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Resultados de la prueba dRIT. Foto cortesía del Proyecto de enfermedades de carnívoros del Serengeti

Recientemente, están disponible pruebas más simples, baratas y fáciles de implementar para el diagnóstico de rabia. Estas pruebas rápidas de inmuno-diagnóstico (también llamadas pruebas inmuno-cromatográficas o pruebas de flujo lateral, LFDs de sus siglas en inglés) para el diagnóstico de rabia ofrecen hacer el diagnostico fuera de un laboratorio, las cuales no requieren ni de equipo, ni entrenamiento excesivo, además de proveer resultados en minutos.

Algunos estudios sobre el uso de estas pruebas rápidas de imuno-diagnóstico han determinado que la prueba es confiable para su uso tanto en el laboratorio como en el campo si ciertas modificaciones que salen del protocolo recomendado por el fabricante son aplicadas. Sin embargo, otro estudio que hizo la evaluación bajo condiciones controladas de laboratorio de seis pruebas rápidas disponibles comercialmente, determino que ninguna de estas es confiable si son comparadas simultáneamente con los resultados de la prueba estándar de oro IFD. Todas las pruebas rápidas demostraron tener una buena especificidad (no produjeron resultados falsos positivos), pero ninguna demostró tener una buena sensibilidad (ya que todas produjeron resultados falsos negativos). Algunas pruebas rápidas tuvieron mejor desempeño que otras y en algunos casos lotes diferentes de la misma prueba tuvieron mejor desempeño, pero en general los resultados fueron decepcionantes.

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Resultados de una prueba rápida de imuno-diagnóstico de rabia. Foto cortesía del: Friedrich Loeffler Institut

Las pruebas rápidas para el diagnóstico de rabia tienen un gran futuro potencial, particularmente si son aplicadas para apoyar el diagnóstico y la vigilancia de la rabia en el campo. Actualmente, estas pruebas rápidas pudieran ser útiles para identificar rápidamente casos positivos de rabia. Sin embargo, las pruebas que resulten negativas no deben ser consideradas como confiables (sobre todo si hubo exposiciones de humanos a animales potencialmente rabiosos), particularmente si no existen otras pruebas diagnósticas confiables que apoyen dicho resultado como la IFD. La membrana que usan estas pruebas puede ser almacenada, preferiblemente bajo condiciones frescas. El RNA presente en estas podría eventualmente ser extraído para llevar a cabo pruebas moleculares de confirmación como la RT-PCR y posterior caracterización mediante secuenciamiento nucleotidico de los amplicones obtenidos.

Usted puede leer más sobre algunos estudios en donde se han usado pruebas rápidas de inmuno- diagnóstico (rapid immunodiagnostic test) aquí.

FAT = Prueba de anticuerpo fluorescente
IFD = Prueba de inmunofluorescencia directa
dRIT = Prueba rápida de inmunohistoquímica directa
OIE = Organización Mundial de Sanidad Animal
OMS = Organización Mundial de la Salud




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Cuarta versión; última actualización: diciembre de 2017